南京億迅生物科技有限公司
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更新時間:2019-11-07 11:03:07瀏覽次數(shù):554
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血鈣濃度檢測試劑盒
測定原理:
在強堿溶液中游離鈣與GBHA反應(yīng)生成紅色鈣-GBHA復(fù)合物,在520nm有吸收峰;通過測定520nm吸光度,計算游離鈣濃度。
自備儀器和用品:
可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/、石英比色皿/96孔板、無水甲醇、丙酮和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體×1瓶(空瓶,試劑自備)。取10 mL試劑瓶。依次加入9 mL無水甲醇和1 mL丙酮,蓋緊混勻即可。
標準液:液體×1瓶,0.3μmol/mL,4℃保存。
血鈣濃度測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到520nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取石英比色皿/96孔板,依次加入蒸餾水12 μL,試劑一50μL,混勻;再加入試劑二50μL,混勻;后加入試劑三100μL,混勻;靜置5min后于520 nm測定吸光度A空白管。做一個空白管即可。
3. 標準管:取石英比色皿/96孔板,依次加入標準液12μL,試劑一50 μL,混勻;再加入試劑二50μL,混勻;后加入試劑三100μL,混勻;靜置5min后于520 nm測定吸光度A標準管。做一個標準管即可。
4. 測定管:取石英比色皿/96孔板,依次加入血液樣品12μL,試劑一50 μL,混勻;再加入試劑二50μL,混勻;后加入試劑三100μL,混勻;靜置5min后于520 nm測定吸光度A測定管。記為A測定管。
注意:加試劑三后,應(yīng)該在30 min內(nèi)完成該管的測定。
血鈣濃度計算:
血鈣含量(μmol /dL)= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V樣品總
=30×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
C標準液:0.3μmol/mL; V樣總:樣品總體積,1 dL=100 mL。
注意事項:
宜早晨空腹采血,并且采血后應(yīng)該盡快完成測定。
血鈣濃度檢測試劑盒