人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人LR抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的LR與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物化的抗人LR抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素??谷薒R抗體與結合在包被抗體上的人LR結合、生物與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,LR濃度與0D450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中LR的濃度。
人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒使用說明:
1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒在收集標本前必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成分是否足夠穩(wěn)定,我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,請及時儲存在4℃的條件下備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請在造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以請避免反復凍融。