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大鼠細(xì)胞株實驗中注意事項:
1、大鼠細(xì)胞株和生物安全柜(或超凈工作臺)先開紫外照射30min。作用:對環(huán)境滅菌(空氣)。(備注:如果著急,至少也要開15分鐘)
在做實驗之前考慮好需要些物品。開始照射之前,將所需要用到的物品都放到生物安全柜(或超凈工作臺)里面。
常用移液槍或電動移液器等,需要在工作臺上放置一套專用設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)箱一般都已經(jīng)調(diào)整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時更換。
2、 顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意:顯微鏡一般都放在細(xì)胞房。
3、 進(jìn)入實驗之前,首先給自己帶上拖鞋、頭套,口罩,實驗服,手套(手套帶雙層)。注意:手套要將袖口套進(jìn)去。實驗服、拖鞋*是細(xì)胞房專用。
4、 開始操作之前先觀察大鼠心肌細(xì)胞株細(xì)胞。
首先觀察細(xì)胞培養(yǎng)液的顏色?,F(xiàn)在的細(xì)胞培養(yǎng)液通常都放有酸堿指示劑(絕大部分是酚紅)。細(xì)胞在培養(yǎng)生長過程中,不斷在培養(yǎng)液上清中累積酸性物質(zhì),時間長了,培養(yǎng)液變?yōu)辄S色(同時培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)耗盡)。
其次鏡下觀察大鼠心肌細(xì)胞株細(xì)胞的生長狀態(tài)是否良好,是否需要傳代。如果生長狀態(tài)不好,需要對培養(yǎng)液進(jìn)行調(diào)整(一般是加大血清濃度)。過于密集出現(xiàn)大片融合或太密集而導(dǎo)致細(xì)胞脫落,則進(jìn)行傳代。
如果長勢良好,且細(xì)胞培養(yǎng)液顏色未發(fā)生變化,可以酌情進(jìn)行1/2、 1/3、1/4換液,也可以全換液??傊暭?xì)胞生長情況而定。
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