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原代細胞實驗流程:
1. 取材:將目標動物麻醉或處死,動物體上取出目標器官或組織。
2. 原代細胞的分離:獲取的組織或器官中含有血液和多種細胞,我們將獲取的組織或器官在無菌環(huán)境下充分剪碎,消化,分散成單細胞。根據(jù)目標細胞的特點選擇不同的篩選方法, 以獲得目標細胞。
3. 培養(yǎng)和鑒定:根據(jù)客戶的需求,爾丙生物將獲得的高純度原代細胞繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代培養(yǎng),也可以凍存處理,滿足不同的實驗需求。
原代細胞分離與培養(yǎng):
原代細胞是來源于不同組織器官,胚胎及血液的新鮮樣本經(jīng)特殊實驗方法處理而制備的原初培養(yǎng)細胞,這一過程被稱為原代細胞分離。原代細胞具有保持原有細胞的基本性質(zhì),如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。
細胞的分離純化和細胞培養(yǎng)技術(shù)是細胞生物學(xué)實驗的基礎(chǔ)。我們通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞。原代細胞培養(yǎng)是指將組織從動物體內(nèi)取出,經(jīng)各種酶(常用)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法剪碎處理,分散成單細胞,在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖的過程。
原代細胞注意事項:
1. 本產(chǎn)品為 50 次操作
2. 操作時,須帶手套
3. 石蠟包埋前,組織切片固定,避免使用甲醛類固定劑
4. 所有操作在室溫下進行
5. 試劑可以重復(fù)使用
6. 原代細胞具有腐蝕性,注意操作安全
7. 染色液(Reagent G)出現(xiàn)沉淀,可以溫熱、攪拌或過濾后使用
8. 染色液(Reagent G)須密封避光,如果變成紅色,則影響染色效果
9. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
10.樣品染色避免過度,肉眼可見深紅色即可終止染色
11.可以使用通用型蘇木素復(fù)染試劑盒(GMS80067.1),增強染色對比度
12.染色完成后,即刻進行光學(xué)顯微鏡觀察
13.本公司提供系列組織生物化學(xué)成分分析試劑產(chǎn)品
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