產(chǎn)品名稱：脫氮副球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Paracoccus denitrificans
貨號：XG01P3937
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

實(shí)時定量PCR：
①β-actin陽性模板的標(biāo)準(zhǔn)梯度制備 陽性模板的濃度為1011，反應(yīng)前取3μl按10倍稀釋（加水27μl并充分混勻）為1010，依次稀釋至109、108、107、106、105、104，以備用。
②反應(yīng)體系如下：
標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)體系
序號  反應(yīng)物  劑量
1   SYBR Green 1 染料  10μl
2  陽性模板上游引物F  0.5μl
3  陽性模板下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  陽性模板DNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。

基因反應(yīng)體系：
序號  反應(yīng)物  劑量
1  SYBR Green 1 染料  10μl
2  內(nèi)參照上游引物F  0.5μl
3  內(nèi)參照下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  待測樣品cDNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。
③制備好的陽性標(biāo)準(zhǔn)品和檢測樣本同時上機(jī)，反應(yīng)條件為：93℃　2分鐘，然后93℃ 1分鐘，55℃ 2分鐘，共40個循環(huán)。
PCR特異性：
1.primers design
這是重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件：
1)足夠長，18～24bp，以保證特異性，當(dāng)然，不是說越長越好，太長的primer同樣會降低特異性，并且降低產(chǎn)量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中間序列要多GC，以增加穩(wěn)定性；
4)避免3'端GCrich，個BASE不要有GC，或者5個有3個不要是GC。
5)避免3'端的互補(bǔ)，否則，容易造成DIMER；
6)避免3'端的錯配；
7)避免內(nèi)部形成二級結(jié)構(gòu)；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值時不算，但在檢測互補(bǔ)和二級結(jié)構(gòu)要加上它們；
9)使用兼并primer時，要參考密碼子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用較高的primer濃度(1μM～3μM)；
10)學(xué)會使用一種design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al。

Calu-1(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

極低密度脂蛋白受體(VLDLR)重組蛋白英文名稱：Recombinant Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR)

MC培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于酸菌飲料中酸菌的菌落計(jì)數(shù)

大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

半固體瓊脂/半固體動力培養(yǎng)基/半固體營養(yǎng)瓊脂/Semi-Solid Agar細(xì)菌動力觀察，菌種保存，H抗原位相變異試驗(yàn)等250克國產(chǎn)/進(jìn)口

支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)/支原體瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基/Mycoplasma Agar Base培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基250克國產(chǎn)/進(jìn)口

UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

AAV-293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2)

胰島素受體(ISR)重組蛋白英文名稱：Recombinant Insulin Receptor (ISR)

巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶4(FUT4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Fucosyltransferase 4 (FUT4)

血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)

血紅素氧合酶2(HO2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)
脫氮副球菌探針法熒光定量PCR試劑盒人細(xì)胞間粘附分子4(ICAM4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒10g00G

鈣雜質(zhì)I對照品標(biāo)準(zhǔn)品　CAS:　　　進(jìn)口、國產(chǎn)　　20mg

格洛苷C;Angoroside C 訂購|咨詢  20mg CERD4蛋白體 αMSH ELISA Kit α黑色細(xì)胞刺激(αMSH)ELISA試盒

人胰島素降解酶(IDE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒100g/瓶

阿托伐醌標(biāo)準(zhǔn)品　CAS:　95233184　Atovaquone　進(jìn)口、國產(chǎn)　　200mg

藍(lán)萼;Glaucocalyxin A  20mg 訂購|咨詢 VRBG瓊脂/結(jié)晶紫中性紅膽葡萄糖瓊脂/VRBGA/Violet Red Bile Glucose Agar/VRBG Agar奶粉中坂崎桿的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人抗存活素抗體(AntiSurv)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒00g/瓶

阿托伐醌相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品　CAS:　　　進(jìn)口、國產(chǎn)　　25mg

黃柏;巴叩 訂購|咨詢  HPLC≥98%,20mg/支 細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶4體 RDH12 ELISA Kit 視黃脫酶12(RDH12)ELISA試盒

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。