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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞株>> A549人肺癌細(xì)胞系
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廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-15 15:22:30瀏覽次數(shù):176次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
產(chǎn)品名稱 | A549人肺癌細(xì)胞系 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | XG-X6321 |
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
ABCG1 英文名稱: 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 0.1ml
Adiponectin receptor 2 英文名稱: 脂聯(lián)素受體2抗體 0.1ml
ANGEL1 英文名稱: ANGEL1蛋白抗體 0.2ml
ANGEL2 英文名稱: ANGEL2蛋白抗體 0.2ml
ANKLE2 英文名稱: ANKLE2蛋白抗體 0.2ml
ANKMY1 英文名稱: 特異性錨樣蛋白1抗體 0.2ml
ANKRD13B 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 0.2ml
ANKRD20A1 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體 0.2ml
ANKRD20A3 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 0.2ml
ANKRD22 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 0.2ml
ANKRD50 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體 0.2ml
ATP6V1G2 英文名稱: 氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成酶6G抗體 0.1ml
ANKRD26 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 0.2ml
ANKRD26 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 0.2ml
ACY3 英文名稱: 丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml
ARSK 英文名稱: 芳香基硫酸酯酶K抗體 0.2ml
Amphiphysin 英文名稱: 神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體 0.2ml
Ankyrin G 英文名稱: 錨定蛋白G抗體 0.2ml
Actin 英文名稱: 肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體 0.1ml
ADAMTS1 英文名稱: 整合素樣金屬蛋白酶與1型抗體 0.1ml
ADAMTS7(NT) 英文名稱: 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗體 (N端抗體) 0.1ml
ADAMTS7 英文名稱: 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗體 0.1ml
beta Adducin 英文名稱: 內(nèi)收蛋白抗體 0.1ml
ADFP 英文名稱: 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA Kit Mouse Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A ELISA kit
小鼠腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子1(TL1)ELISA Kit Mouse tumor necrosis factor-like ligand 1,TL1 ELISA kit
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體ELISA Kit Mouse tumor necrosis factor α(TNF-α)antibody ELISA Kit
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA Kit Mouse Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA Kit Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA Kit Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit
小鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA Kit Mouse Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit
小鼠脂肪酸合成酶(FASN)ELISA Kit Mouse Fatty acid synthase,FASN ELISA kit
小鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA Kit Mouse Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA Kit Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA Kit Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA kit
小鼠整合素αM(Itgam/CD11b)ELISA Kit Mouse Integrin alpha-M,Itgam/CD11b ELISA Kit
小鼠整合素α-IIb(Itga2b/CD41)ELISA Kit Mouse Integrin alpha-IIb,Itga2b/CD41 ELISA Kit
小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)ELISA Kit Mouse Integrin alpha-X,Itgax/CD11c ELISA Kit
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA Kit Mouse Mucin-7,MUC7 ELISA Kit
A549人肺癌細(xì)胞系小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA Kit Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA Kit
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA Kit Mouse Mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit
小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA Kit Mouse Mucin-2,MUC2 ELISA Kit
小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA Kit Mouse Mucin-1,MUC1 ELISA Kit
小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA Kit Mouse regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA Kit Mouse apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit Mouse apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
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