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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞株>> HELF 人胚肺成纖維細(xì)胞
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所 在 地上海市
更新時間:2020-10-19 09:51:06瀏覽次數(shù):217次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | HELF 人胚肺成纖維細(xì)胞 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | XG-X6355 |
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng):
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
1,5-Dihydroxynaphthalene酮中特硫溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKR1CL2 antibody人血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒
Sevoflurane Related CoMpound C;1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol固體水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKR1D1 antibody人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒
Malonaldehyde bis(diethyl acetal)固體水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKR7A2 antibody人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒
1-10-Phenanthroline Monohydrate固體水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKR7A3 antibody人雙睪酮(DHT)ELISA試劑盒
o-Phenanthroline monohydrochloride monohydrate一水合乳糖水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKT antibody人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒
1-Prop-2-enoxy-4-(4-prop-2-enoxyphenyl)sulfonyl-benzene一水合檸檬酸鉀水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKT1 antibody人雌激素(E)ELISA試劑盒
1,1'-DIANTHRIMIDE二水合酒石酸鈉水分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AKT1 antibody人孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
NAL-純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- akt1 antibody人超敏游離雌三醇(uE3)ELISA試劑盒
HELF 人胚肺成纖維細(xì)胞Human CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體anti- PHF14 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CASP8 (Caspase 8) ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體anti- PHF17 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit抗體anti- PHF19 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體anti- PHF2 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CAD (Caspase Activated Deoxyribonuclease) ELISA Kit細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體anti- PHF20 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CASP 9 (Caspase 9) ELISA Kit24S-羥化酶anti- PHF21A antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CTNNα1 (Catenin, Alpha 1) ELISA Kit 肉棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體anti- PHF5A antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 肉氧位基轉(zhuǎn)移酶抗體anti- PHF6 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
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