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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>活體成像用試劑系列>> 50 mgCy3
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50 mg
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-13 13:34:46瀏覽次數(shù):290次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)
Super Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680)
Super Fluor 750(效果同Alexa Fluor 750)
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | Cy3 |
英文名稱 | Sulfo-Cy3 |
貨號 | XG-P2304 |
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
白色念珠菌凍干粉
明亮發(fā)光桿菌
草菇
球孢鏈霉菌
糞產(chǎn)堿桿菌
停乳鏈球菌5-溴水楊酸,英文名或英文縮寫:5-Bromosalicylic acid,級別:CP,規(guī)格:500毫克
硅同 DC-702 Siliconq DC-702
9H-Fluorene, 9-butyl- 3952-42-9
異佛爾酮二胺 3-Aminomethyl-3,5,5-trimethylcyclohexy... 2855-13-2 100ML 通用試劑
DEAE葡聚糖/DEAE Dextran 高純,分子量50萬 10克 國產(chǎn)/進口EPHB3 Others Human 人 EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠漿細胞瘤;MPC-11
Hela, 人細胞系
CSC, 小鼠心肌細胞 人小腸頸部表皮樣癌細胞,Ca Ski細胞 F81(貓腎細胞)
人導(dǎo)管瘤細胞;UACC812
ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照)
Cy3魯氏毛霉
苦杏仁甙發(fā)酵管5ml 30 支/盒
大腸桿菌
熱帶靈芝
皺木耳
三七根腐病菌Cylindrocarponsp.UBA培養(yǎng)基25毫升2~8℃
79350-10-0相關(guān)物質(zhì)BCefdinir Related CoMpound B;(6R,7R)-7-[2-(2-aMino-4-thiazolyl)acetaMido]-8-oxo-3-vinyl-5-thia-1-azabicyclo[4,2,0]oct-2-ene-2-carboxylic acid
2-Chloropyrimidine-5-boronic acid pinacol ester 1003845-08-6
異戊酸葉醇酯 cis-3-Hexenyl 3-methylbutanoate,≥97% 35154-45-1 25G 通用試劑
兔肌動蛋白/Actin from rabbit muscle BR,85% 1、5、25毫克 國產(chǎn)/進口MAPKAPK5 Others Human 人 MAPKAPK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1
CL-0081F81(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 肝癌細胞,HCC-9204細胞 NCI-H292(肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移))
小鼠垂體瘤細胞;GT1-1
CD2 Others Human 人 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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