DNA氣溶膠污染去除劑

描述：氣溶膠是懸浮于氣體介質中粒徑一般為 1 nm ~ 1 mm 的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態(tài)散體系，其分 散并懸浮在氣體介質中的核酸聚合物，廣泛存在于實驗室 桌面、儀器、耗材以及空氣中。 DNA 氣溶膠與核酸擴增過程（PCR、LAMP 等）相 伴相生?？諝馀c液體面摩擦、離心機離心、劇烈地搖動反 應管、PCR 開蓋、移液器的反復吸樣、污染物的外泄等 途徑，都會產(chǎn)生 DNA 氣溶膠。分子實驗室作為科研和臨 床檢驗場所，PCR（或 LAMP）的使用頻率較高，且樣本 和擴增目標經(jīng)常出現(xiàn)多批次相同的情況，DNA 氣溶膠污 染在實驗區(qū)域內(nèi)不斷累積，污染風險不斷增加，假陽性的 發(fā)生頻率也越來越高。PCR 等技術的高擴增效率，產(chǎn)生 的核酸氣溶膠污染，會導致檢測結果的假陽性。假陽性意 味著實驗不可信，并且直接造成實驗室經(jīng)濟損失。更嚴重 的是，如果形成氣溶膠污染，則可引起整個 PCR 實驗室 的污染，甚至要關閉實驗室。 由于 DNA 高耐熱性、高吸附能力、對有機溶劑的高 耐受性特點，無論采用高壓滅菌、清水沖洗、酒精擦洗均 不能去除 DNA 污染。 全新開發(fā)的強力核酸 酶（DNA Cleaning 酶），可在室溫 15min 內(nèi)將 DNA 污染物降解為 2-6 bp 的寡核苷酸，無論是移液器、PCR 儀、耗材、實驗室桌面上的 DNA 吸附污染物均被酶解。 DNA 被酶解后，DNA Cleaning 酶可在 60℃烘干 10min 或者 70%酒精擦拭后不可逆失活，從而避免后續(xù)對實驗 的影響。該制品不含任何有機毒性溶劑，無毒、無腐蝕性， 不對設備造成任何損傷。

 儲存： -20℃可保存 3 年。 

一、模板DNA：PCR反應需要模板DNA，如從細胞、組織、血液中提取DNA等；

二、引物：PCR反應的兩個引物，分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域，引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物；

三、dNTPs：PCR反應中需要四種dNTPs，包括脫氧腺苷酸（dATP）、脫氧胸苷酸（dCTP）、脫氧鳥苷酸（dGTP）、脫氧胞嘧啶酸（dTTP），用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程，用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增；

四、Taq DNA聚合酶：PCR反應需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等，用于擴增DNA鏈；

五、PCR buffer溶液：對PCR反應具有緩沖作用，調節(jié)反應pH，硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛，可增強PCR反應特異性，從而提高反應效率；

六、酶切體系：PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟，常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準，用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒：用于純化PCR反應產(chǎn)物；

①Oligo dT
選擇Oligo dT時，要求RNA必須有Poly A，所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT，對RNA樣品的質量要求較高，不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應，建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT，尤其適合模板豐度很低的情況（比如某個gene表達量很低）。選擇隨機引物時，鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板，然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系，一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng，如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng，可能會導致小片段產(chǎn)物（＜500bp）的增加和長片段、全長產(chǎn)物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物（GSP）是某個基因序列的一部分，與模板互補的引物。該引物需要結合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結合，每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此，當分析多種目標時，則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同，所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物，建議對退火溫度進行優(yōu)化。