傅經(jīng)理
β-半乳糖苷酶染色
產(chǎn)品介紹:β—半乳糖甘酶染色,衰老細(xì)胞通常體積變會(huì)大,表達(dá)pH6.0時(shí)有高酶活性的β-半乳糖苷酶。染色中以X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下,半乳糖苷鍵被水解生成深藍(lán)色產(chǎn)物,光學(xué)顯微鏡下很容易觀(guān)察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。
實(shí)驗(yàn)流程:
(1) 樣本接收:細(xì)胞爬片、冰凍切片
(2) 實(shí)驗(yàn)步驟:β半乳糖染液孵育—染核—脫水封片
(3) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:染色好的玻片
注意事項(xiàng):
1、β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蝕性和毒性,操作時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。
2、β-半乳糖苷酶染色液B在剛剛?cè)芙夂髸?huì)觀(guān)察到有沉淀,屬正?,F(xiàn)象,充分混勻后,沉淀會(huì)全部溶解。使用前必須確保沉淀全部溶解,并且混勻。
3、配制染色工作液時(shí)需使用聚丙烯容器或玻璃容器,不使用聚苯乙烯容器。但染色時(shí)可以在聚苯乙烯容器中進(jìn)行?!揪郾┤萜骺梢愿邷馗邏簻缇?,而聚苯乙烯容器不適合高溫高壓滅菌,一旦高溫高壓處理就會(huì)嚴(yán)重變形?!?/span>