傅經理
堿性品紅染色
一、實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。
2、氧化:酸化:硫酸=1:1混合)氧化5min,自來水洗。
3、漂白:草酸溶液漂白1-2min,至無色,流水沖洗2min,95%的乙醇稍浸洗。
4、堿性品紅染色:切片入品紅染液中浸染并加蓋,室溫下3~4h,流水沖洗。
5、背景分化:鹽酸酒精分化至無染液脫下,彈力纖維清晰的紫紅色,背景淡紫或近乎無色。
6、復染VG:將飽和kuweisuan與酸性品紅9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,無水乙醇三缸快速脫水。
7、透明封片:干凈的二甲苯透明1-5min,中性樹膠封片。
8、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
二、染色判讀:
彈力纖維紫紅色,膠原纖維紅色,背景其他成分黃色。
三、注意事項:
1、VG復染過程中水洗要快,防止紅色褪掉,無水乙醇也要快洗,防止黃色變暗。