傅經(jīng)理
剛果紅染色
一、 實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。
2、剛果紅染色:切片入剛果紅染液1h,自來水洗2min。
3、背景分化:氫氧化鉀溶液分化,至陽性斑塊明顯,背景基本無色,自來水洗。
4、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來水洗,分化液分化,自來水洗,返藍(lán)液返藍(lán),流水沖洗。
5、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I 5min -無水乙醇II 5min-無水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。
6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
二、結(jié)果判讀:
淀粉樣蛋白呈紅色,細(xì)胞核呈淺藍(lán)色。
三、注意事項:
1、區(qū)分甲狀腺膠質(zhì)、彈力纖維和膠原纖維,可能都會染成紅色;
2、分化時要掌握恰當(dāng),分化不足,膠原纖維也呈紅色,分化過度,淀粉樣變蛋白也可脫色。