RIPA裂解液（強(qiáng)）WB配套產(chǎn)品

1.裂解細(xì)胞提取總蛋白質(zhì),主要用于Western,免疫沉淀。
2.主要由NP-40、脫氧膽酸鈉、磷酸鈉、SDS、EDTA、蛋白酶抑制劑等。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白樣品，可以用BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
3.—20℃,12個(gè)月

使用方法：

　　對(duì)于組織樣品：

　　1.組織塊用冷PBS洗滌，去除血污。剪成小塊置于勻漿器中。

　　2.加入10倍組織體積本試劑(使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)使用高速組織研磨儀*勻漿。

　　3.將勻漿液轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管中，振蕩。冰浴30 min，期間用移液器反復(fù)吹打，確保細(xì)胞*裂解。

　　4.12000g離心5 min，收集上清，即為總蛋白溶液。

　　對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：

　　1.對(duì)于貼壁細(xì)胞：

　　(1)用PBS沖洗細(xì)胞2-3次。后一次*吸干殘留液。

　　(2)加入適當(dāng)體積的本試劑(使用前數(shù)分內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)于培養(yǎng)板、瓶內(nèi)3-5 min。期間反復(fù)晃動(dòng)培養(yǎng)板、瓶，使試劑與細(xì)胞充分接觸。

　　(3)用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞及試劑刮下，收集到1.5mL離心管中。

　　2.對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，每6孔板細(xì)胞加約250 μL本試劑(在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)，振蕩。

　　3.冰浴30 min，期間每10 min用200 μL移液器反復(fù)吹打數(shù)次，確保細(xì)胞*裂解。

　　4.12000g離心5 min，收集上清，即為總蛋白。

RIPA裂解液（強(qiáng)）WB配套產(chǎn)品