傅經(jīng)理
斑馬魚黑色素(ML)定量檢測試劑盒
?產(chǎn)品信息
【用途】
該試劑盒采用競爭法檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中ML的濃度。
【檢測原理】
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預(yù)包被抗斑馬魚黑色素(ML)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入斑馬魚黑色素(ML)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入HRP標(biāo)記的斑馬魚黑色素(ML)抗原(酶標(biāo)抗原),經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-酶標(biāo)抗原的免疫復(fù)合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀450nm波長上測定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測樣品中斑馬魚黑色素(ML)的濃度負(fù)相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計算出樣本中斑馬魚黑色素(ML)的濃度。
【特異性】
可檢測樣本中的ML , 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。
【重復(fù)性】
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%
【批內(nèi)差】
取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
【批間差】
選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
【精密度】
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
【穩(wěn)定性】
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。 為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。
斑馬魚黑色素(ML)定量檢測試劑盒
?實驗所需自備物品
1、450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸餾水或去離子水.
5、脫脂棉吸水紙.
6、37℃恒溫箱.
7、100ml和1000ml量筒.