目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
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更新時(shí)間:2024-01-01 20:50:14瀏覽次數(shù):386評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P96855
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
6-氮雜尿嘧啶shēng huà shì jì容量:RT,避光25克 英文名稱MousepANCAELISAKit小鼠抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲固定)(pANCA)規(guī)格:96T/48T
依魯替尼(PCI32765)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BTK抑制劑Ibrutinib,PCI-32765 Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 3 (AIL-R3) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 石蠟切片組織線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
右旋蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品(R)-Lansoprazole HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 ELISAKitPP人蛋酸酶規(guī)格:48T/96T
右旋蘭索拉唑質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR(R)-Lansoprazole HumanInfluenzavirusesIgG,FLUELISA試劑盒人流感病毒抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
樂伐替尼質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR抑制劑Lenvatinib(E7080) 組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-3)活性比色法定量檢測試劑盒20 人胎球蛋白A(Fetuin A)試劑盒 Human Fetuin A ELISA Kit
四丁基化銨(離子對(duì)色譜級(jí))Tetrabutylammonium iodide質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜級(jí) 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: OxLDL ELISA Kit ELISAKitGHRH羊促生長激素釋放激素規(guī)格:48T/96T
三辛胺(離子對(duì)試劑)Trioctylamine質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)試劑 小鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測試劑盒MouseHexokinase,HKELISAKit 96T/48T Humanc-sisELISAKit人c-sisELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(0.05M) oxalate solution質(zhì)量規(guī)格:0.05M 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)試劑盒 human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA Kit 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
剛果紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC))Congo red質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC) RatBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit大鼠骨特異性堿性1酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠游離脂肪酸(FFA)試劑盒 Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit
山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-酰-L-谷酰,英文名或英文縮寫:Alu-Gln,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184三溴新務(wù)醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2
BHK細(xì)胞,幼倉鼠腎細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)