目錄:上海帛科生物技術有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次格特隱球菌PCR試劑盒
產品名稱:格特隱球菌PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BK-P97075
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
脫色袋 Destaining bags 簡介:Efficiently remove EB, Coomassie Blue, and other biological dyes from solution. The special adsorbent mixture retains dye moleculars in a convenient bag for safe removal and incineration. One bag will remove 5 mg of Ethidium Bromi
磺胺嘧啶 Sulfadiazine 分子式:C10H10N4O2S 分子量:250.27
霉素 Kitasamycin 分子式:C40H67NO14 分子量:785.96
甲砜霉素 Thiamphenicol 分子式:C12H15Cl2NO5S 分子量:356.22
甲磺酸吉米沙星 Gemifioxacin Mesylate 分子式:C18H20FN5O4.CH4SO3 分子量:485.49
甲磺酸培氟沙星 Pefloxacin mesylate dihydrate 分子式:C17H20FN3O3.CH4O3S 分子量:429.46
真菌瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT,避光25克 人血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
100-37-8二乙基乙醇≥99.5%Dietxylaminoethanol 豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit
DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫蘇糖醇蛋白組學級5G27565-41-9Frozen Humanplateletgrowthfactor,PGFELISAKit 人血小板生長因子(PGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
鄰錄錄芐 2-Chlorobqnzyl chloridq 611-19-8 HumanLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆蛋白組學級10G9035-81-8Frozen 組織前列腺型酸性酶(PACP)活性比色法定量檢測試劑盒20次
格特隱球菌PCR試劑盒氧化鐠shēng huà shì jì容量:RT10克 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(鈣離子載體) 小鼠褪黑素(MT)免疫試劑盒 Mouse Melatonin,MT ELISA Kit
APS/TEMEDPOLYMERIZATIONTAETSAPS/TEMED 聚合生物技術級 轉基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒 48T
安西奈德 cMcinonidq 210-69-6 Humansolublecytokinereceptor,sCKRE
注意事項:產品僅用于科研1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。