目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次香菇源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:香菇源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P96871
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
5-甲氧基-2-甲基色胺 5-Methoxy-alpha-methyltryptamine,98% 1137-04-8 1G 通用試劑 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA檢測試劑盒Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 96T/48T
葉黃素; 二羥基-d-胡蘿卜素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>85%,標(biāo)準(zhǔn)品Xanthophyll ELISAKitTARC/CCL17人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96T 破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: Tetanus Ab ELISA Kit
鋅試劑(≥85%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:≥85%(HPLC)Zincon 小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 ,英文名: OT/BGP ELISA Kit RabbitLaminin,LNELISA試劑盒兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,3-二甲基-5-吡唑酮質(zhì)量規(guī)格:0.961,3-Dimethyl-5-pyrazolone 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA檢測試劑盒RatParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 96T/48T humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISA試劑盒人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氟啶胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Fluazinam 人包蟲抗體IgG 試劑盒 Human echinococcus aibody IgG ELISA Kit HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
司班40質(zhì)量規(guī)格:BRSpan* 40 大鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測試劑盒RatHexokinase,HKELISAKit 96T/48T Humanc-junELISA試劑盒人c-junELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
美索巴莫質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP 32Methocarbamol 人白介素-1β前體(Pro-IL-1β)試劑盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember12,EAR12ELISAKit人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
美索巴莫(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Methocarbamol 英文名稱MouseLPSELISAKit小鼠脂多糖(LPS)規(guī)格:96T/48T 牛乳酸(Lactate)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甲基潑尼松龍質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Methylprednisolone PH3-4顯色(METHYLORANGE)指示溶液50毫升 人足細胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)試劑盒 Human Podocalyxin,PCX ELISA Kit
香菇源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse藜蘆醛shēng huà shì jì容量:100克
T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人細胞裂解液 (陽性對照) 三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6
人臍靜脈平滑肌細胞cDNAHUVSMC cDNA西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:2~8℃50毫升
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / T
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
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