目錄:上海帛科生物技術有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P96965
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
wo7iumMETABISULFITE焦亞鈉(重亞鈉)ACS級白色粉末RTsigma RabbitsolubleVascuolarcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISA試劑盒兔子可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸尼卡地平Nicardipine 質量規(guī)格:>97%,BR 動物軟骨組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 脂肪酸結合蛋白4(FABP-4)ELISA試劑盒 ,英文名: FABP-4 ELISA Kit
鹽酸尼卡地平(標準品)Nicardipine 質量規(guī)格:含量測定 RatProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒大鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISA試劑盒人血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰香蘭素(>98%,BR)o-Vanillin質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠天冬酸轉酶(AST)ELISA試劑盒 ,英文名: AST ELISA Kit ELISAKitMIP-2小鼠巨噬細胞炎性蛋白2規(guī)格:48T/96T
草酰(>98%,BR)Oxalyldihydrazide質量規(guī)格:>98%,BR 豚鼠血清(NO)ELISA檢測試劑盒guineapigniicoxide,NOELISAKit 96T/48T Humanai-braiissueaibody,ABAbELISAKit人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十二烷基磺酸鈉(>95%,Tech Grade) dodecylbenzenesulfonate質量規(guī)格:>95%,Tech Grade 小鼠血纖蛋白原γ鏈(FGG)ELISA試劑盒 ,英文名: FGG ELISA Kit ELISAKitFFA小鼠游離脂肪酸規(guī)格:48T/96T
硅酸鈉九水(>98%,BR) silicate hydrate質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠細胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA檢測試劑盒MouseSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 96T/48T Humancoloncancer-specificaigen-2,CCSA-2ELISAKit人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)Bluo-Gal質量規(guī)格:>98%,BR 人基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)試劑盒 Human maix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 人溶菌酶(LZM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1酸氫二鈉二水Di hydrogen phosphate dihydrate質量規(guī)格:>99%,BR RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠葉酸(FA)試劑盒 Mouse Folic acid,FA ELISA Kit
牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系普羅布考質量規(guī)格:>99%Probucol
EB病毒轉化的人B細胞;KM933 人髂動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL普羅布考(標準品)質量規(guī)格:含量測定Probucol
胎牛血清FBSIpatasertib(GDC0068)質量規(guī)格:>98%,高選擇性的pan-Akt抑制劑GDC-0068;RG7440
IL21R Others Rat 大鼠 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) L-天冬氨酸鎂質量規(guī)格:>98%,BRL-A
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。