目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次乙型腦炎(乙腦)病毒RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品名稱:乙型腦炎(乙腦)病毒RT-PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BK-P97037
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
熒光桃紅B Phloxine B 分子式: C20H2Br4Cl4Na2O5 分子量:829.64
ALLURA RED AC 分子式:C18H14N2O8S2Na2 分子量:496.43
直接藍(lán)71 Direct blue 71 分子式:C40H23N7Na4O13S4, 分子量:1029.88
子種綠A Alphazurine A 分子式:C37H35N2NaO6S2 分子量:690.8
天青石藍(lán) Celest
鏈球菌G蛋白(r-SPG) Streptococcus Protein G 分子式: 分子量:28 kDa
氯化血紅素;血晶素 Hemin 分子式: C34H32ClFeN4O4 分子量:651.95
凝血酶來源于牛血漿 Thrombin from bovine plasma 產(chǎn)品介紹: 凝血酶(Thrombin)來源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成的。凝血酶是凝血酶原(凝血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白質(zhì)水解酶,其催化纖維蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進(jìn)一步聚合,在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊。
牛胎球蛋白 Fetuin from fetal bovine serum 用途及描述:本產(chǎn)品經(jīng)過細(xì)胞培測試(0.8g/L),適用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,在水中溶解度為1mg/mL。牛胎球蛋白包含血清的組分,有助于細(xì)胞在培養(yǎng)基中的聯(lián)結(jié)和傳播,牛胎球蛋白在胚胎癌細(xì)胞培養(yǎng)基中的使用濃度通常為500μg/mL,用于補(bǔ)充無血清F12培養(yǎng)基。 牛胎球蛋白可以作為糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn),其包含12個半胱氨酸殘基,主要組成成分為:多肽74%,己糖8.3%,氨基己醣5.5%,唾液酸8.7%,本產(chǎn)品僅供研發(fā)使用,不可供藥物,,家庭或其他用途。
牛血清白蛋白(BSA) Albumin(bovine fraction V); 物理性狀及指標(biāo): 外觀:………………………………淺黃色凍干粉末,無肉眼可見雜質(zhì)
重組人甲狀旁腺激素1-34,英文名或英文縮寫:PTH1-34,級別:BR,95%,規(guī)格:500毫克 HumanAmylinELISAKit人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
51-20-75-溴尿嘧啶5-BroMouracil;5-BroMo-2,3H)-pyriMidinedione; 人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
metxylviolet甲基青蓮500克BR,50% 豚鼠環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒 Guinea pig cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
1,9-二溴壬烷;九亞基二溴 1,9-DibroMononcnq;NoncMqthylqnq dibroMidq;NoncMqthylqnq broMidq 4249-33-1 胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 ,英文名: PL ELISA Kit
基磺醋酯 Mqthyl mqthcnqsulfonctq 1966/7/3 MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙型腦炎(乙腦)病毒RT-PCR試劑盒乙二安四乙酸二鈉鋅鹽100克2~8℃ Human vasopeptidase inhibitors (VPI) ELISA Kit 人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒
28631-66-5本胺藍(lán)CI 42755 HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISAKit 人抗1脂酰絲氨酸抗體(APSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
氧化鈣shēng huà shì jì容量:500克 HumanEpinephrine/Adrenaline,E
注意事項(xiàng):產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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