Amplite 比色法葡萄糖氧化酶檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于定量蛋白的試劑盒，葡萄糖氧化酶是二聚體蛋白質(zhì)，其催化β-D-葡萄糖氧化成過氧化氫和D-葡糖酸-1,5-內(nèi)酯，其被水解成葡糖酸。 它廣泛用于測定體液中的葡萄糖以及從飲料，食品和其他農(nóng)產(chǎn)品中去除殘留的葡萄糖和氧氣。 此外，葡萄糖氧化酶通常用于生物傳感器中以檢測葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶檢測試劑盒為溶液中葡萄糖氧化酶的測量提供了一種快速而靈敏的方法。 它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進行，并且很容易適應自動化而無需分離步驟。 該試劑盒使用我們的Amplite Red底物，可使用570 nm的吸光度酶標儀進行監(jiān)測。 使用Amplite 比色葡萄糖氧化酶檢測試劑盒，我們檢測到低至12.5 mU / mL的葡萄糖氧化酶。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 比色法葡萄糖氧化酶檢測試劑盒。

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備工作溶液（50μL）
2.添加葡萄糖氧化酶標準品或測試樣品（50μL）
3.在37°C孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測OD = 570nm處的吸光度

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環(huán)。
1.1 Amplite 紅色儲備液（250X）：
將100μLDMSO（組分E）加入到Amplite Red（組分A）的小瓶中。注意：在硫醇如二硫蘇糖醇（DTT）和2-巰*乙醇存在下，Amplite Red不穩(wěn)定。反應中DTT或2-巰*乙醇的終濃度應不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應應在pH 7-8下進行。推薦提供的測定緩沖液（pH 7.4）。

1.2 HRP庫存解決方案（50X）：
將1mL測定緩沖液（組分B）加入到辣根過氧化物酶（組分C）的小瓶中。

1.3 葡萄糖氧化酶原液（100 U / mL）：
將1mL測定緩沖液（組分B）加入葡萄糖氧化酶（組分D）的小瓶中。

1.4 葡萄糖原液（10X）：
將5mL測定緩沖液（組分B）加入葡萄糖小瓶（組分F）中。

2.標準溶液

葡萄糖氧化酶標準
通過將2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶儲備溶液稀釋到200μL測定緩沖液（組分B）中來制備葡萄糖氧化酶標準品，以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶標準溶液。 然后進行1：100連續(xù)稀釋，然后進行1：2連續(xù)稀釋，得到連續(xù)稀釋的葡萄糖氧化酶標準品，從10 mU / mL至0.156 mU / mL（GOS1 - GOS7）。

3.工作溶液

將20μLDelterite Red儲備液（250X），100μLHRP儲備液（50X）和500μL葡萄糖儲備液（10X）加入4.3 mL分析緩沖液（組分B）中，制成5 mL工作溶液。