微型模式動(dòng)物、模式植物、大體積細(xì)胞等在生命科學(xué)研究中有著非常廣泛的應(yīng)用，但是由于這些對象體積太大，普通的流式細(xì)胞儀的粒徑尺寸一般在幾十微米，難以對秀麗線蟲、斑馬魚這樣的大粒徑模式生物進(jìn)行分析和分選；手工鏡下分選非常耗時(shí)耗力、效率低下、準(zhǔn)確性難以保證。COPAS

詳細(xì)介紹

微型模式動(dòng)物、模式植物、大體積細(xì)胞等在生命科學(xué)研究中有著非常廣泛的應(yīng)用但是由于這些對象體積太大普通的流式細(xì)胞儀的粒徑尺寸一般在幾十微米難以對秀麗線蟲、斑馬魚這樣的大粒徑模式生物進(jìn)行分析和分選；手工鏡下分選非常耗時(shí)耗力、效率低下、準(zhǔn)確性難以保證。COPAS高通量分選系統(tǒng)是一款特殊設(shè)計(jì)的分選型流式細(xì)胞儀流通室徑向尺寸可達(dá)2000微米可以對秀麗線蟲、蠶卵、斑馬魚卵及幼魚、果蠅等模式生物進(jìn)行高通量、自動(dòng)化的分析和分選。

COPAS高通量分選系統(tǒng)能夠很大程度上提高了分選效率完成大規(guī)模的樣品分選工作實(shí)現(xiàn)高通量分選。還可對多種數(shù)據(jù)進(jìn)行分析可以開展用傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)手段難以開展的課題實(shí)驗(yàn)。

COPAS高通量分選系統(tǒng)在國際上有數(shù)百家實(shí)驗(yàn)室的成功應(yīng)用案例在很多期刊也有很多引用文獻(xiàn)。該設(shè)備的應(yīng)用能夠幫助實(shí)驗(yàn)室在很大程度上提高實(shí)驗(yàn)效率、拓展科研方法、縮短科研產(chǎn)出時(shí)間。

型號COPAS FP

主要特點(diǎn)

? 多種規(guī)格的流動(dòng)室可選分選粒徑20-1500um的模式生物、細(xì)胞群、大粒徑生物微粒、微珠
? 全自動(dòng)、快速、精確分選和分析
? 提供分選顆粒數(shù)字化定量數(shù)據(jù)可用于用戶對目標(biāo)群體的統(tǒng)計(jì)分析
? 無菌環(huán)境及溫和氣流分選方式能夠有效保持分選樣品的潔凈和存活率

主要功能

? 高通量分選能夠很大程度上提高分選效率同時(shí)可以開展用傳統(tǒng)試驗(yàn)方法難以開展的實(shí)驗(yàn)
? 設(shè)備通過檢測樣品的多種光學(xué)信號依據(jù)檢測到的信號進(jìn)行自動(dòng)化分選排除了人為主觀因素分選更客觀更準(zhǔn)確
? 設(shè)備可以把生物樣本自動(dòng)分選到244896或384孔板中也可以自定義實(shí)現(xiàn)分選的自動(dòng)化
? COPAS高通量分選系統(tǒng)是在常規(guī)分選型流式細(xì)胞儀基礎(chǔ)上研發(fā)和改進(jìn)而成流動(dòng)室內(nèi)壓力小采用溫和的氣流分選方式可以確保生物體的活性和完整性對后續(xù)培養(yǎng)、分析甚至是再次分選不會產(chǎn)生負(fù)面影響
? 系統(tǒng)自動(dòng)存儲每個(gè)模式生物、微粒的光學(xué)數(shù)據(jù)可用于進(jìn)一步的統(tǒng)計(jì)和分析

? 可根據(jù)需要選配專業(yè)化分析軟件能夠在樣本徑向長度方向上進(jìn)行多達(dá)8000個(gè)斷層的光學(xué)監(jiān)測給出細(xì)胞-器官水平的光學(xué)參數(shù)信息包括尺寸、光密度和熒光強(qiáng)度（例如斑馬魚心臟的神經(jīng)元上的熒光信號）并以峰值曲線圖的形式導(dǎo)出可提供峰的個(gè)數(shù)、峰寬、峰高和相對位置等各種參數(shù)

? 儀器操作簡單一個(gè)人便可完成大規(guī)模的樣品分選工作實(shí)現(xiàn)高通量分選

主要應(yīng)用

? 種群差異分析（Population differences analysis）

·成長階段分選

·藥物篩選、化學(xué)誘導(dǎo)
? 熒光表達(dá)篩選（Fluorescence expression sorting）

·單熒光篩選

·多熒光篩選
? 基因表達(dá)定位分析（Gene expression localization analysis）

·熒光峰值篩選

·樣品亞群分析
? 熒光定量分析（Fluorescent quantitative analysis）

工作原理及主要配置

工作原理

通過獲取多種光學(xué)參數(shù)徑向尺寸、光密度、三色熒光強(qiáng)度對微粒進(jìn)行分選

分選方式

采用溫和的氣流分選方式能夠很大程度上保障分選后生物微粒的生物活性和完整性（可對同一個(gè)樣品多次分選）

光學(xué)部件布局

COPAS高通量分選系統(tǒng)的光學(xué)原件布局俯視圖

流動(dòng)室

每條線蟲或生物微粒被鞘液包裹依次通過流動(dòng)室在流經(jīng)過程中測量出各種分選參數(shù)

激光器

配備488nm激光器用于測量物體的軸向長度和光學(xué)密度還可以用來激發(fā)熒光

根據(jù)研究需要可調(diào)整激光器的配置有多種規(guī)格激光器可選375nm405nm488nm561nm或640nm

分選參數(shù)

通過檢測和分析生物微粒的多種參數(shù)進(jìn)行分選

飛行時(shí)間（TOF）、透光度（EXT）、熒光強(qiáng)度（FLU）同時(shí)檢測多達(dá)三種顏色的熒光

基礎(chǔ)分析軟件

分選參數(shù)設(shè)置、分選控制與數(shù)據(jù)分析

Profile高階分析軟件

具備多種參數(shù)峰值特性分選功能

生物微粒通過流動(dòng)室沿軸向方向?qū)⒐饷芏群蜔晒鈭D案數(shù)字化

下圖是使用Profile軟件Profiling GFP-expressing seam cells in nematodes（牛津大學(xué)伍拉德實(shí)驗(yàn)室）

LP Sampler自動(dòng)進(jìn)樣器

COPAS高通量分析系統(tǒng)可配合LP Sampler組成一套更加完整的高通量分選平臺實(shí)現(xiàn)對多孔板樣品的自動(dòng)化加樣和自動(dòng)分選

主要技術(shù)參數(shù)

· 用于做所有發(fā)育階段的秀麗線蟲、10-150um的細(xì)胞與細(xì)胞集群、海膽胚胎、生物微珠、花粉、腎導(dǎo)管細(xì)胞等

· 可自動(dòng)檢測流經(jīng)系統(tǒng)的每個(gè)樣品的各種檢測參數(shù)并記錄與統(tǒng)計(jì)

· 流通室內(nèi)徑尺寸250um

· 可以檢測多種參數(shù)飛行時(shí)間（TOF）、透光度（EXT）、熒光強(qiáng)度（FLU）同時(shí)檢測多達(dá)三種顏色的熒光

· 包含系列高精度的檢測元件如光電二極管和光電倍增管、系列光柵可同時(shí)檢測綠色黃色和紅色熒光

· 配備488nm固體激光器用于測量物體的軸向長度和光學(xué)密度還用來激發(fā)熒光

· 熒光檢測靈敏度:FITC<100MESF

· 全峰寬變異系數(shù):CV<2%

· 濾光片熒光通道濾光片包括530/30nm、585/42nm、670nm LP

· 樣品檢測處理速度1000個(gè)樣品/秒；分選時(shí)樣品處理速度為50個(gè)樣品/秒

· 自動(dòng)分選精度＞95%

· 樣品接收器可選用24孔板48孔板96孔板

· 每個(gè)孔板樣品數(shù)量可自由定義最多每個(gè)孔可加載570個(gè)樣品（標(biāo)準(zhǔn)96孔板）

· 具有自動(dòng)化的X-Y移動(dòng)臺可放置微孔板或其它收集器自動(dòng)加載定位

· 最小分選體積0.4ul

· 采用通用型樣品杯容量為50ml

· 具有內(nèi)置攪拌混勻功能通過軟件設(shè)置混勻參數(shù)

· 采用的氣流分選機(jī)制減少分選對樣品的影響分選過程對樣品的生物活性無不良影響

· 具有樣品回收功能用于收集沒被分選的樣本使樣本可以重復(fù)使用

· 可設(shè)置分選樣品時(shí)的液滴長度和延遲時(shí)間

· 具有大容量鞘液容器容量4L可支持系統(tǒng)連續(xù)運(yùn)行6小時(shí)

· 具備壓力實(shí)時(shí)監(jiān)測功能可實(shí)時(shí)測量鞘液壓力、樣品壓力、分選壓力、清洗壓力

· 具備熒光補(bǔ)償功能高精度自動(dòng)補(bǔ)償裝置在線或脫機(jī)補(bǔ)償

· 配備計(jì)算機(jī)工作站并預(yù)裝操作系統(tǒng)和分析軟件

· 基于PC機(jī)和WINDOWS操作平臺的軟件系統(tǒng)具備實(shí)時(shí)分析功能

· 數(shù)據(jù)可追溯系統(tǒng)自動(dòng)保存每個(gè)樣品的檢測數(shù)據(jù)可保存為CSV格式可用于后期分析

· 自動(dòng)統(tǒng)計(jì)分選樣品占總樣品的比例并實(shí)時(shí)自動(dòng)顯示

What’s new with COPAS?

In the most recent update of the COPAS platform we have upgraded the system electronics and this moved COPAS to the newer, friendlier, more powerful FlowPilot software suite. This change is denoted by the name COPAS FlowPilot, abbreviated as COPAS FP. In this new version the model names COPAS BIOSORT, SELECT, PLUS and XL have been replaced by the more meaningful COPAS FP-250, FP-500, FP-1000 and FP-2000.
The COPAS FP platform is designed for the measurement of objects ranging in size from 20–1500 microns (diameter). Each of the four COPAS FP models features a fixed, specially engineered fluidic path, flow cell and optics optimized for a specific subset of that size range to provide maximum speed, accuracy, resolution and throughput, depending on the application. Instruments can dispense objects either into bulk receptacles or multiwell plates.
A 488 nm solid state laser is used to measure both the size and optical density of the objects, as well as for fluorescence excitation. Each COPAS FP system can be equipped with up to three lasers.
The real-time analysis of these measured parameters is used to make sort decisions and only those objects meeting the user-selected sort criteria are gently dispensed into multiwell plates or stationary receptacles. Those objects not meeting the sort criteria are diverted by a puff of air to a sample recovery container, where they may be recaptured, unharmed and still viable.
Instruments are equipped with an X-Y stage to permit the dispensing of objects into micro-wells, including 24-, 48-, 96-, and 384-well plate formats. Using the FlowPilot™ software, users may custom design templates or use default templates.
Factory trained personnel will install your new COPAS FP system and train you at your site in the operation and routine maintenance of the system and accessories.
All systems are supplied with a Windows® workstation running FlowPilot™ software for operation and analysis.

Choosing a COPAS FP Model

Each COPAS FP system features a specially engineered fluidic path and flow cell optimized for a specific object size range to achieve the highest accuracy and sensitivity possible. The table shown at Choosing the Right Platform and Model summarizes the largest object size recommended for each COPAS FP model and also provides general system recommendations based on some sample applications. The applications listed are not exhaustive, but simply meant to provide a general overview of system capabilities. For a more detailed discussion of your particular application, including those applications that are not listed here, please contact our applications scientists directly at 0317.

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