*還原酶抗體，Anti-GSR/GRase上海安研現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。規(guī)格：0.1ml，0.2ml；濃度：1mg/ml；類型：一抗；產(chǎn)品價(jià)格：電詢；用途：僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。貨期：現(xiàn)貨；保存：Store at -20 °（ Not yet tested in other applications.Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user）點(diǎn)擊查看更多產(chǎn)品信息

*還原酶抗體，Anti-GSR/GRase細(xì)胞培養(yǎng)（特別是傳代細(xì)胞）被支原體污染是個(gè)世界性問題。國(guó)內(nèi)外研究表明，95%以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale）、*支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）和菜氏無膽甾原體（A.laidlawii），為牛源性。國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。 
支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（某些支原體在人體是正常菌群）、培養(yǎng)基的污染、被污染細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材的污染、制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染，等等。 
體外生長(zhǎng)的細(xì)胞對(duì)微生物及一些有害有毒物質(zhì)沒有抵抗能力，因此培養(yǎng)基應(yīng)達(dá)到無化學(xué)物質(zhì)污染、無微生物污染（如細(xì)菌、真菌、支原體、病毒等）、無其他對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用的生物活性物質(zhì)污染（如抗體、補(bǔ)體）。對(duì)于天然培養(yǎng)基，污染主要來源于取材過程及生物材料本身，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格選材，嚴(yán)格操作。對(duì)于合成培養(yǎng)基，污染主要來源于配制過程，配制所用的水，器皿應(yīng)十分潔凈，配制后應(yīng)嚴(yán)格過濾除菌。 
由于體外培養(yǎng)細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力，而且培養(yǎng)基中的抗生素抗污染能力有限，因而培養(yǎng)細(xì)胞一旦發(fā)生污染多數(shù)將無法挽回。支原體污染后，因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞*共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細(xì)胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺，實(shí)則細(xì)胞手到多方面潛在影響，如引起細(xì)胞變形，影響DNA合成，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等。 

抗生素主要用于消毒培養(yǎng)液，是培養(yǎng)過程中預(yù)防微生物污染的重要手段，也是微生物污染不嚴(yán)重時(shí)的“急救”方法。不同抗生素殺滅微生物不同，應(yīng)根據(jù)需要選擇。 
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)破碎的細(xì)胞甚多，培養(yǎng)細(xì)胞需要頻繁改善營(yíng)養(yǎng)環(huán)境才能支持*傳代培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)該懷疑支原體污染。支原體污染難以觀察特殊的外觀變化，培養(yǎng)液也不渾濁。 

Collect cells （confluent T-25） by trypsinization and spin. 
Lyse the pellet with 100 µl lysis buffer on ice for 10 min. 
For 500,000 cells, lyse with 20 µl. 
Spin at 14,000 rpm （16,000 g） in an Eppendorf microfuge for 10 min at 4°C. 
Transfer the supernatant to a new tube and discard the pellet. 
Determine the protein concentration （Bradford assay, A280, or BCA） 
（We use the Bradford assay from Bio-Rad.） 
Take x µl （= y µg protein） and mix with x µl of 2x sample buffer. 
Boil for 5 min. 
Cool at RT for 5 min. 
Flash spin to bring down condensation prior to loading gel.

上海安研商貿(mào)有限公司，是專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物試劑，抗體，細(xì)胞，標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品的公司，在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，代理許多*水平的高科技產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得*好評(píng)。

蛋白質(zhì)的制備是一項(xiàng)十分細(xì)致的工作。涉及物理學(xué)、化學(xué)和生物學(xué)的知識(shí)很廣。近年來雖有了不少改進(jìn)，但其主要原理仍不外乎兩個(gè)方面：一是利用混合物中幾個(gè)組分分配率的差別，把它們分配于可用機(jī)械方法分離的兩個(gè)或幾個(gè)物相中，如鹽析、有機(jī)溶劑提取、層析和結(jié)晶等；二是將混合物置于單一物相中，通過物理力場(chǎng)的作用使各組分分配于不同區(qū)域而達(dá)到分離的目的，如電泳、超離心、超濾等。由于蛋白質(zhì)不能溶化，也不能蒸發(fā)，所能分配的物相只限于固相和液相，并在這兩相間互相交替進(jìn)行分離純化。制備方法可按照分子大小、形狀、帶電性質(zhì)及溶解度等主要因素進(jìn)行分類。按分子大小和形態(tài)分為差速離心、超濾、分子篩及透析等方法；按溶解度分為鹽析、溶劑抽提、分配層析、逆流分配及結(jié)晶等方法；按電荷差異分為電泳、電滲析、等電點(diǎn)沉淀、離子交換層析及吸附層析等；按生物功能專一性有親合層析法等。

Agarose plug: 
1% agarose dissolved in 1x Resolving gel buffer. 
（I make 50 ml, keep melting it as I need it, and re-adding water to maintain agarose conc.） 
Resolving gel: 24 ml of a 9% gel 
5.4 ml 40% acrylamide/bisacrylamide （29:1 mix） 
3 ml 8x Resolving gel buffer 
15.6 ml water 
12 µl TEMED 
60 µl 20% ammonium persulfate 
Stacking gel: 8 ml 
1 ml 40% acrylamide/bisacrylamide （29:1 mix） 
2 ml 4x Stacking gel buffer 
5 ml water 
8 µl TEMED 
21.6 µl 20% ammonium persulfate 

由于不同生物大分子結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)不同，分離方法也不一樣。即同一類生物大分子由于選用材料不同，使用方法差別也很大。因此很難有一個(gè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的方法對(duì)任何蛋白質(zhì)均可循用。因此實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行充分調(diào)查研究，查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，對(duì)欲分離提純物質(zhì)的物理、化學(xué)及生物學(xué)性質(zhì)先有一定了解，然后再著手進(jìn)行實(shí)驗(yàn)工作。對(duì)于一個(gè)未知結(jié)構(gòu)及性質(zhì)的試樣進(jìn)行創(chuàng)造性的分離提純時(shí)，更需要經(jīng)過各種方法比較和摸索，才能找到一些工作規(guī)律和獲得預(yù)期結(jié)果。其次在分離提純工作前，常須建立相應(yīng)的分析鑒定方法，以正確指導(dǎo)整個(gè)分離純化工作的順利進(jìn)行。高度提純某一生物大分子，一般要經(jīng)過多種方法、步驟及不斷變換各種外界條件才能達(dá)到目的。因此，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程方法的優(yōu)劣，選擇條件效果的好壞，均須通過分析鑒定來判明。