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HCG在放射免疫法中的測定

時間:2013/1/9閱讀:1598
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 詳情請看:HCG在放射免疫法中的測定

一、原理

HCG是放射性同位素標記技術與抗原抗體免疫反應相結合的超微量分析法,是用放射性核素(如25I/3H)標記的極微量的示蹤抗原*(Ag*)/抗體*(Ab*)與待測抗原Ag/抗體Ag)一起來競爭結合有限的特異性抗體(Ab)/抗原(Ag),故稱飽和分析或競爭抑制法,其反應過程為:Ag*•Ab量固定,Ag*+Ag>Ab可結合的數(shù)目(抗原過量),Ag*與Ag競爭結合Ab,直到反應達到平衡,形成的AD*•Ab量隨著Ag量改變:Ag量大,與Ab結合的機會多,Ag*•.Ab少,反之,則形成的Ag*•.Ab多。Ag量與Ag*.Ab量之間可以競爭抑制曲線表示。

二、方法

放射免疫測定必須有3種基本試劑:

()能與待測物(配體)專一結合的結合試劑,通常是專一抗體受體;

(2)具有放射活性的配體標記物,常用的核素有25I及3He;

(3)能將與試劑結合的配體與未結合的配體分離的分離試劑。

在競爭性測定中,加入定量的抗體和標記配體,反應中未標記配體(待測物)與標記配體競爭結合試劑,未標記配體的量愈多,標記配體與抗體相結合的概率就愈低,從而標記配體的結合部分(B)低,經(jīng)過一定時間抗體與配體的結合達到平衡狀態(tài)后,可用分離試劑結合的配體(B)與未結合的配體(F)分離,用計數(shù)器計數(shù)結合部分(B)標本中的HcG量可通過比較標本B的計數(shù)與標準品的計數(shù)(標準曲線)求得。

()25碘一尿HCG(PEG)藥盒組分包括:HCG標準管6瓶,凍干;HCG抗體(藍色)瓶,凍干;25碘一HCG(紅色)瓶,凍干;正常兔血清5瓶,凍干;磷酸鹽緩沖液瓶,溶液;PEG 瓶,溶液。曲線范圍50~200Iu/L。

標準曲線:以標準濃度為橫坐標,以結合率為縱坐標,繪制標準曲線,依此求得標本的HCG一β濃度。

正常參考值:<250U/L。

保存:2~8℃。

有效期:35天。

(2)25碘一HCG(PR=免疫分離試劑)藥盒組分包括:HCG標準6瓶,凍干;HCG抗體(藍色)瓶,凍干;25碘一HCG(紅色)瓶,凍干;NSB 瓶,溶液;溫育液l瓶,溶液;PR 瓶,溶液。

曲線范圍:25~2000Iu/L。

靈敏度:<25IU/L。

標準曲線:以標準濃度為橫坐標,以結合率為縱坐標繪制標準曲線,以此求得標本的HCG一β濃度。

正常參考值:<00Iu/L。

保存:2~8℃。

有效期:35天。

(3)25碘一HCG—B(DAP=雙抗+PEG)藥盒組份包括:

HCG標準6瓶,凍干;HCG—B抗體(藍色)瓶,凍干;25碘一HCG(紅色)瓶,凍干;DA 2瓶,凍干;溫育液瓶,溶液;PEG 瓶,溶液。

曲線范圍:5~320Iu/L。

靈敏度:5IU/L。

特異性:抗HCG—B血清與LH的交叉反應率<5%。

標準曲線:以標準濃度為橫坐標,以結合率為縱坐標繪制標準曲線,以此求得HCG—β濃度。

正常參考值:<20Iu/L。

保存:2~8℃。

有效期:35天。

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