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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2019-04-12 11:36:56瀏覽次數(shù):554次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品名稱:變形桿菌屬通用PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Proteus spp.PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。?
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
?
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
?人基因組DNA,男性英文名(EN):[-(Ethoxycarbonyl)ethyl]triphenylphos...CAS No.:3008-6-7規(guī)格(SP):5G類別(Key):表面活性劑
人基因組DNA,女性英文名(EN):Butyltriphenylphosphonium chlorideCAS No.:337-7-0規(guī)格(SP):25G類別(Key):表面活性劑
人基因組DNA混合液英文名(EN):Dodecyltriphenylphosphonium bromide,98%CAS No.:550-55-規(guī)格(SP):0G類別(Key):表面活性劑
小鼠基因組DNA英文名(EN):Benzyltriphenylphosphonium bromide,96%CAS No.:449-46-3規(guī)格(SP):0G類別(Key):表面活性劑
人培養(yǎng)細(xì)胞基因組DNA英文名(EN):n-Propyltriphenylphosphonium bromide ...CAS No.:592-75-規(guī)格(SP):50G類別(Key):表面活性劑
端粒酶重復(fù)片段擴(kuò)增試劑盒(TRAP試劑盒)英文名(EN):Methyltriphenylphosphonium chloride,97%CAS No.:03-5-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):表面活性劑
AFLP試劑盒(EcoRI-MseI)英文名(EN):Tetraphenylphosphonium bromide ,97%CAS No.:275-90-8規(guī)格(SP):0G類別(Key):表面活性劑
cDNA文庫構(gòu)建試劑盒英文名(EN):P,P-Dichlorophenylphosphine ,97%CAS No.:644-97-3規(guī)格(SP):25G類別(Key):表面活性劑
一站式PCR-SSCP套裝英文名(EN):Ethoxycarbonylmethyl(triphenyl)phospho...CAS No.:530-45-6規(guī)格(SP):25G類別(Key):表面活性劑
RAPD PCR試劑盒(含銀染)英文名(EN):(Carbethoxyethylidene)triphenylphospho...CAS No.:577-37-3規(guī)格(SP):5G類別(Key):表面活性劑
DOP-PCR試劑盒英文名(EN):Ethylacetate,99.8%CAS No.:4-78-6規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
克必隆eTS抑制性差減雜交PCR試劑盒英文名(EN):Methyl acetate,≥98%CAS No.:79-20-9規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
3'-RACE試劑盒英文名(EN):Butyl acetate,≥99%CAS No.:23-86-4規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
5'-RACE試劑盒英文名(EN):Tributyl phosphate,≥99.0%CAS No.:26-73-8規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
克必隆RACE試劑盒英文名(EN):Ethyl benzoate,≥99%CAS No.:93-89-0規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
克必隆 eTS 核心試劑盒英文名(EN):Methyl formate,99%CAS No.:07-3-3規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
克必隆eTS mRNA擴(kuò)增試劑盒英文名(EN):Ethyl formate,97%CAS No.:09-94-4規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
克必隆eTS PCR法cDNA合成試劑盒英文名(EN):Isopropyl formate,98%CAS No.:625-55-8規(guī)格(SP):50G類別(Key):通用試劑
變形桿菌屬通用PCR檢測試劑盒品牌空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)0.ml美國Jackson公司分裝
基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)0.ml美國Jackson公司分裝
諾沃克病毒(NV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
A組輪狀病毒(HRV-A)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
B組輪狀病毒(HRV-B)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
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