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馬節(jié)桿菌PCR檢測試劑盒使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
產(chǎn)品名稱:馬節(jié)桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Arthrobacter equiPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標:點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.馬節(jié)桿菌PCR檢測試劑盒試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
反應五要素:
馬節(jié)桿菌PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?PHA-P植物血球凝集素PHA-P25克BR,0u/mg,甘薯,液體
PHA植物血凝素公斤BR,0.5-3u/mg,馬鈴薯,粉末
PHⅢ三號凝聚劑500毫克AR,90%
PGN肽聚糖25毫克BR
PGA葉克色固
Permutit交替砂00克CP,4.5%
Periodic acid仲高25TAR,33%
Peptidase肽鏈端解酶25克BR,92%,三水物
Pepstatin A抑肽素25克BR,Ⅳ型,≥25CDU/mg
Pepsin(porcine stomach mucose)胃液素00克生物技術級,300u/mg
PEP-K磷稀醇單鹽25克AR,99%
PEPC磷醇式羧化酶克生物技術級,
PEP-3CHA磷醇三環(huán)己鹽00克AR,99.9%
PEP磷醇單環(huán)己鹽5克AR,99%
Pentetrazol,5-五基四唑25克AR,80%
馬節(jié)桿菌PCR檢測試劑盒定堿 英文名稱:Wtlfordine CAS號:37239-5-3 規(guī)格:
次堿 英文名稱:Wilforine CAS號:088-09-8 規(guī)格:0mg
吉堿 英文名稱:Wilforgine CAS號:37239-47-7 規(guī)格:5mg
內酯甲 英文名稱:Wilforlide A CAS號:8404-7-2 規(guī)格:20mg
去甲澤拉木醛 英文名稱:Demethylzeylasteral CAS號: 0736-88- 規(guī)格:20mg
龍膽苦苷 英文名稱:Gentiopicroside CAS號:2083-76-9 規(guī)格:20mg
龍膽山酮酚 英文名稱:Bellidifolin CAS號:2798-25-6 規(guī)格:0mg
羅漢果苷ⅴ 英文名稱:Mogroside V CAS號:8890-36-4 規(guī)格:20mg
連翹苷 英文名稱:Forsythin CAS號:487-4-2 規(guī)格:20mg
連翹酯苷A 英文名稱:Forsythoside A CAS號:7996-77- 規(guī)格:20mg
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