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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):836次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月產(chǎn)品名稱:豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Porcine Endogenous Retrovirus(PERV)RTPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
使用方法:
一、豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
?重組蛋白L英文名(EN):Bromo-tris-pyrrolidinophosphonium hexa...CAS No.:32705-5-2規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
糖蛋白染色試劑盒英文名(EN):(7-Azabenzotriazol--yloxy)tripyrrolid...CAS No.:563-83-0規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
磷酸蛋白染色試劑盒英文名(EN):N-(3-Dimethylaminopropyl)-N′-ethylcar...CAS No.:25952-53-8規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
標(biāo)簽蛋白染色試劑盒英文名(EN):2-Bromoethylamine hydrobromide ,≥98.0%CAS No.:2576-47-8規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Bradford法蛋白定量試劑盒英文名(EN):o-Dianisidine dihydrochlorideCAS No.:20325-40-0規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Bradford法蛋白定量試劑盒英文名(EN):,0-Phenanthroline monohydrochloride ...CAS No.:3829-86-5規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
BCA法蛋白定量試劑盒英文名(EN):PDT disulfonate,96.5-03.5 %CAS No.:69898-45-9規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
超敏型BCA法蛋白定量試劑盒英文名(EN):N,N-Diethyl-p-phenylenediamine sulfate...CAS No.:6283-63-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
還原劑兼容型BCA 蛋白定量試劑盒英文名(EN):p-Aminophenol hydrochlorideCAS No.:5-78-5規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
改良Lowry法蛋白定量試劑盒英文名(EN):N-Methyl-,2-benzenediamine dihydrochl...CAS No.:2548-68-9規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
蛋白酶抑制劑混合液英文名(EN):,4-Diaminobenzene dihydrochlorideCAS No.:624-8-0規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
蛋白磷酸酶抑制劑混合液英文名(EN):N,N-Dimethyl-,4-phenylenediamine oxal...CAS No.:62778-2-5規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
蛋白磷酸酶抑制劑混合液2英文名(EN):DMPD 2HCl,≥99.0%CAS No.:536-46-9規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
細(xì)菌蛋白酶抑制劑英文名(EN):,3-Diaminoguanidine monohydrochloride...CAS No.:36062-9-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
哺乳動(dòng)物蛋白酶抑制劑英文名(EN):DCIPCAS No.:620-45-規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
植物蛋白酶抑制劑英文名(EN):N,N-Dimethyl-p-phenylenediamine sulfat...CAS No.:536-47-0規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
酵母蛋白酶抑制劑英文名(EN):9-Aminoacridine hydrochloride monohydr...CAS No.:5247-22-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
His標(biāo)簽蛋白蛋白酶抑制劑英文名(EN):2-Amino-5-(diethylamino)toluene Monohy...CAS No.:205-79-8規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)濃縮液 0.ml進(jìn)口分裝
豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒濃縮液 0.ml進(jìn)口分裝
豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)濃縮液 0.ml進(jìn)口分裝
豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒濃縮液 0.ml進(jìn)口分裝
豬弓形蟲(TOX)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)濃縮液 0.ml進(jìn)口分裝
注意事項(xiàng):
①豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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