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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 白堊立克次氏體PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):3827次
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一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
?產(chǎn)品名稱:白堊立克次氏體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Rickettsia gravesiiPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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性能指標:點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?L- 色酸英文名(EN):Methyl pyromucate,≥98%CAS No.:6-3-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
衣英文名(EN):S-Furfuryl thioacetate,99%CAS No.:3678-68-7規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
吐溫 -20英文名(EN):Methyl 4-Chlorobutyrate,≥98%CAS No.:353-37-5規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
吐溫 -60英文名(EN):Trimethylhexamethylene Diisocyanate (2...CAS No.:28679-6-5規(guī)格(SP):25ML類別(Key):通用試劑
吐溫 -80英文名(EN):2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate,90%CAS No.:24-94-7規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
L- 酪酸英文名(EN):Artesunate,98%CAS No.:88495-63-0規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
尿苷 -5'- 二磷酸英文名(EN):Ethyl (Triphenylphosphoranylidene)acet...CAS No.:099-45-2規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
傘形英文名(EN):Ethyl Nitroacetate,97%CAS No.:626-35-7規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
英文名(EN):4-Nitrocinnamic Acid Ethyl Ester,99%CAS No.:953-26-4規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )英文名(EN):Isopropyl Chloroformate,98%CAS No.:08-23-6規(guī)格(SP):25ML類別(Key):通用試劑
尿素英文名(EN):Bis(2-carbopentyloxy-3,5,6-trichloroph...CAS No.:75203-5-9規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
尿酸英文名(EN):Ethyl Bromodifluoroacetate,98%CAS No.:667-27-6規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
尿苷英文名(EN):Titanium diisopropoxide bis(acetylacet...CAS No.:7927-72-9規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
L- 纈酸英文名(EN):Methyl 2,5-Dihydroxybenzoate,99%CAS No.:250-46-規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
鹽酸萬古英文名(EN):D-Cellobiose octaacetate,98%CAS No.:5346-90-7規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
維生素 B英文名(EN):tert-Butyl isocyanate,97%CAS No.:609-86-5規(guī)格(SP):5ML類別(Key):通用試劑
維生素 B6英文名(EN):3-Chloropropyl isocyanate,96%CAS No.:300-9-0規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
維生素 B2英文名(EN):2-Chlorophenyl Isocyanate,98%CAS No.:3320-83-0規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
白堊立克次氏體PCR檢測試劑盒孔雀石綠等水溶性非食用色素速測盒0.5ml國產(chǎn)
硼酸和硼砂快速檢測試劑0.5ml國產(chǎn)
鹽含量速測液200份樣品用量0.5ml國產(chǎn)
注水肉檢測試紙0.5ml國產(chǎn)
肉類水分速測儀0.5ml國產(chǎn)
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