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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)商
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):634次
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.網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)商試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月產(chǎn)品名稱:網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)商
英文名稱:Dictyocaulus spp.PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
使用方法:
一、網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)商樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?相關(guān)物質(zhì)D標準品 英文名稱: CAS:07698-7-8
相關(guān)物質(zhì)B標準品 英文名稱: CAS:3348-09-
相關(guān)物質(zhì)A標準品 英文名稱: CAS:64744-50-9
季胺基甲基丙烯酸酯共聚物B型標準品 英文名稱: CAS:33434-24-
季胺基甲基丙烯酸酯共聚物A型標準品 英文名稱: CAS:33434-24-
相關(guān)物質(zhì)A標準品 英文名稱: CAS:500904-6-0
磺胺熔點標準物標準品 英文名稱: CAS:63-74-
磺胺喹喔啉相關(guān)物質(zhì)A標準品 英文名稱: CAS:
熔點標準物標準品 英文名稱: CAS:44-83-2
相關(guān)物質(zhì)D標準品 英文名稱: CAS:5840-5-5
相關(guān)物質(zhì)C標準品 英文名稱: CAS:07-28-9
相關(guān)物質(zhì)B標準品 英文名稱: CAS:5840-52-6
相關(guān)物質(zhì)A標準品 英文名稱: CAS:82-48-7
乙二胺同系物標準品 英文名稱: CAS:
相關(guān)物質(zhì)A標準品 英文名稱: CAS:
網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)商土壤細菌DNA分離+高質(zhì)純化試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20/50次
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注意事項:
①網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)商加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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