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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):361次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.無漿體PCR檢測試劑盒品牌試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月產(chǎn)品名稱:無漿體PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Anaplasma centrale PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
使用方法:
一、無漿體PCR檢測試劑盒品牌樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
?PVPP聚聚25克CP,99%
PVF聚醇縮5克AR,99%
PVCPVC多元復(fù)合潤滑劑25克BR,
PVB聚醇縮樹脂25克ACS,99.8%
PVA聚酯00克AR,99%
PVA聚醇0克光學(xué)純,99.8%
Putrescine dihydrochloride,4-二雙鹽鹽25克BR,
Puromycin dihydrochloride二化嘌呤毒素00毫克3400~2000,液體,5條帶
Purine-nucleoside phosphorylase嘌呤核苷磷化酶0毫克BR,5-0u/ul
Purine尿(雜)環(huán)5克USP級,50mg/ml
Pullulanase聚麥芽三糖酶5克BR,5′(NNN NNN)3′
Puerarin0克BR,粘度50 mPa.s
PUC9質(zhì)粒PUC9質(zhì)粒25克超純,
PUC8質(zhì)粒PUC8質(zhì)粒5克BR,50u/mg
PTSC對磺??薈P,
無漿體PCR檢測試劑盒品牌和厚樸酚 英文名稱:Honokiol CAS號:35354-74-6 規(guī)格:20mg
黃杞苷 英文名稱:Engeletin CAS號:572-3-6 規(guī)格:20mg
胡黃連苷Ⅰ 英文名稱:PicrosideⅠ CAS號:27409-30-9 規(guī)格:20mg
胡黃連苷Ⅱ 英文名稱:Picroside Ⅱ CAS號:3902-20-9 規(guī)格:20mg
胡黃連苷 III 英文名稱:6446-95-6 CAS號:C25H30O3 規(guī)格:0mg
青蒿素 英文名稱:Artemisinin CAS號:63968-64-9 規(guī)格:20mg
英文名稱:Artemether CAS號:7963-77-4 規(guī)格:20mg
青 英文名稱:Artesunate CAS號:88495-63-0 規(guī)格:20mg
英文名稱:Dihydroartemisinin CAS號:7939-50-9 規(guī)格:20mg
青蒿酸 英文名稱:Artemisinic acid CAS號:80286-58-4 規(guī)格:20mg
注意事項(xiàng):
①無漿體PCR檢測試劑盒品牌加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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