公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，人的心房肌細(xì)胞質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-0分鐘并自然晾干。
 運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
）準(zhǔn)備RPMI-640培養(yǎng)基(RPMI-640：GIBCO，貨號(hào)2875-09)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，0%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，0%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

細(xì)胞凍存：
對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲(chǔ)存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險(xiǎn)  (冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注：DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類(lèi)物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類(lèi)試劑。 
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí)，必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣，我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明，以便獲得結(jié)果。 
）在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。 
2）細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低°C。
3）必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4）將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲(chǔ)存；溫度高于 -50°C 時(shí)，冷凍的細(xì)胞將開(kāi)始變質(zhì)。 
5）必須使用無(wú)菌凍存管儲(chǔ)存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存 
6）必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。 
7）所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無(wú)菌狀態(tài)。必須采用正確的無(wú)菌技術(shù)，并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一分離與培養(yǎng)：
    、無(wú)菌條件下，取出-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.% *和0.% I型膠原酶），混懸0s，置37℃條件下消化0min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含0% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸0s，置37℃消化0 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，200r/min 離心0min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有0％ FBS DMEM/F2培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
    、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次0min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞5min；
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次0min，然后在4℃條件下，用0.％Triton X-00透膜5min；
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次0min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
    4、按: 00的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次0min，按：50的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置h；
    6、用PBS沖洗3次，每次0min，倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
 

 細(xì)胞還原型* GSH 濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 植物* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 體液* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 組織* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 血液* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 植物過(guò)氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)菌過(guò)氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 組織過(guò)氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 血液過(guò)氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞過(guò)氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
細(xì)胞ATP酶活性堿性法染色試劑盒 免疫測(cè)定
  組織超氧化物陰離子比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞超氧化物陰離子比色法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 植物氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 動(dòng)物組織氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
組分氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞培養(yǎng)懸液氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 動(dòng)物細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 體液氧化應(yīng)激活性氧 ROS 魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 血液氧化應(yīng)激活性氧 ROS 魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞樣品*氧化酶活性染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片乙酰*脂酶活性染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞乙酰*脂酶活性染色試劑盒 免疫測(cè)定
 全組織蔗糖酶活性染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片蔗糖酶活性染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞蔗糖酶活性染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片磷脂尼羅紅 NileRed 間接熒光染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 直接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 間接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光直接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光間接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片總游離*菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片總游離*菲律賓 FILIPIN 熒光直接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片總游離*菲律賓 FILIPIN 熒光間接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞總游離*菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞游離*毛地黃皂苷法 DIGITONIN 舒爾茨染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片總*舒爾茨染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞游離*毛地黃皂苷法 DIGITONIN 高氯酸萘醌 PAN 染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片總*高氯酸萘醌 PAN 染色試劑盒 免疫測(cè)定
 人的心房肌細(xì)胞特殊石蠟切片總*高氯酸萘醌 PAN 間接染色試劑盒 免疫測(cè)定
 細(xì)胞總*高氯酸萘醌 PAN 染色試劑盒 免疫測(cè)定
 冰凍切片中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒 免疫測(cè)定
 特殊石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O間接染色試劑盒 免疫測(cè)定