上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
聯(lián)系電話
13585831301
公司信息
- 聯(lián)系人:
- 李小姐
- 電話:
- 021-59541103
- 手機(jī):
- 13585831301
- 售后電話:
- 13585831301
- 傳真:
- 021-60443211
- 地址:
- 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號(hào)
- 郵編:
參考價(jià) | 面議 |
- 型號(hào) T25
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2022-03-30 10:38:34瀏覽次數(shù):256
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細(xì)胞的訂購(gòu)信息:
英文簡(jiǎn)稱:U-937細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U-937
規(guī)格:T25
形態(tài)特性:?jiǎn)魏思?xì)胞
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
特征特性:該細(xì)胞是由NilssonK實(shí)驗(yàn)室于1974年從一名37歲的患有惡性組織細(xì)胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分離建立的。1979年來(lái)的研究顯示該細(xì)胞在人混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)物上清、佛波酯、VitD3、γ-IFN、TNF和的誘導(dǎo)下可以向終末單核細(xì)胞分化。該細(xì)胞不合成免疫球蛋白,EBV陰性;可產(chǎn)生、β-2-微球蛋白,受PMA刺激后可產(chǎn)生TNF-α;表達(dá)C3R;可作轉(zhuǎn)染宿主;表達(dá)Fas,對(duì)TNF和抗Fas的抗體敏感。
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法:維持細(xì)胞濃度在1×105~2×106/ml;根據(jù)細(xì)胞濃度3~4換液1次。
貨號(hào):CS-X63328
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞在對(duì)數(shù)生,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌消化過(guò)度,吹打不可太用力,不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
1,6-二溴己烷大腸埃希氏桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
1,6-二溴己烷用途: 食用、藥用
1,6-二己烷平菇拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
環(huán)丁鹽鹽綠膿桿菌拉丁屬名: Pseudomonas sp
環(huán)丁鹽鹽假單胞菌屬拉丁屬名: Hericium erinaceus
3-氨猴頭菇拉丁屬名: Natronorubrum bangense
3-氨班戈錯(cuò)湖嗜鹽紅菌拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
二硫新疆鹽地桿菌拉丁屬名: Penicillium janczwskii
二硫楊奇青霉拉丁屬名: Bifidobacterium infantis reuter
1,8-辛二長(zhǎng)雙歧桿菌嬰兒亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
1,8-辛二鏈格孢拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp
1-溴-6-己烷金黃色葡萄球菌RN4220拉丁屬名: Bacillus sp.
1-溴-6-己烷芽孢桿菌屬拉丁屬名: Halobacterium halobium
1-溴-6-己烷鹽生鹽古桿菌拉丁屬名: Rhodanobacter sp.
1-溴-6-己烷紅細(xì)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
(酰)三苯化磷芥鏈格孢用途: 害蟲(chóng)生物防治
U-937細(xì)胞糖轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Fluazifop-P-butyl solution
環(huán)指蛋白27抗體姜(標(biāo)準(zhǔn)品) Famoxadone solution
透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體降二氫辣椒 Flufenoxuron
G蛋白偶聯(lián)受體激酶6抗體降香(標(biāo)準(zhǔn)品) Fomesafen
Rho GTP酶激活蛋白26抗體膠蒼術(shù)甙,羧蒼術(shù)苷二鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutolanil
G蛋白α抑制蛋白1抗體焦地黃苯乙甙A1 Flusilazole
生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體焦地黃苯乙甙B1 Fipronil
合成酶抗體焦性沒(méi)食子(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenobucarb
血型糖蛋白δ抗體絞股藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenpyroximate