上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-06 10:07:10瀏覽次數(shù):408
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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5537LC 的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5537LC
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
胞那樣有較大的縫隙腦微血管內(nèi)皮細胞缺乏內(nèi)皮細胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;腦微血管內(nèi)皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運系統(tǒng),從而產(chǎn)生 “兩極分化”的表現(xiàn)型。 與外周內(nèi)皮細胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細胞表面表達細胞粘附分子,調(diào)控白細胞進入大腦。由于微血管內(nèi)皮細胞的器官特異性,內(nèi)皮細胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的腦動脈組織。
2)細胞鑒定:血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
腦動脈血管內(nèi)皮細胞
細胞詳述
腦動脈為肌型動脈,管壁薄,血管周圍沒有支持組織。但腦動脈血管內(nèi)膜厚,有發(fā)達的內(nèi)彈力膜。
血管新生是從原有血管系統(tǒng)的內(nèi)皮細胞增殖、游走而形成新的子代血管分支的過程。腦動脈新生可以重建有效血供,從而改善多發(fā)性、彌漫性腦動脈粥樣硬化所致的腦缺血,zui終預(yù)防癡呆和腦梗死發(fā)生。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的腦動脈組織。
2)細胞鑒定:血管假性血友病子(WF)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
腦血管周細胞
細胞詳述
腦血管周細胞分布于腦組織的微血管系統(tǒng)中,調(diào)節(jié)血管形成、穩(wěn)定和功能的關(guān)鍵素。周細胞典型的特征是有一個突出的核,核周圍胞漿較少,有許多平行于微血管長軸的突起,這些突起逐漸變細并包繞微血管腔,起到對管腔的支持作用。同時,一個周細胞可以通過伸展的突起與微循環(huán)中的多個毛細血管接觸。此外,周細胞和內(nèi)皮細胞間的相互作用在血管新生中具有極為重要的作用。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
腦膜細胞
細胞詳述
腦膜是緊貼腦表面和腦室內(nèi)面的一層透明薄膜,內(nèi)含豐富的血管。在腦室與室管膜上皮共同形成脈絡(luò)叢產(chǎn)生腦脊液。腦膜的病變導(dǎo)致腦脊液動力學(xué)改變,從而形成腦脊液壓力增高,zui終導(dǎo)致腦積水。目前關(guān)于腦積水的發(fā)病機制,研究認為腦脊液循環(huán)障礙可能與腦膜纖維化密切相關(guān)。腦膜細胞是組成腦膜纖維化的主要細胞。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
腦皮質(zhì)神經(jīng)元
細胞詳述
神經(jīng)元,又稱神經(jīng)細胞,是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。
神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞,它由細胞體和細胞突起構(gòu)成。在長的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細小分支叫做神經(jīng)末梢。細胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細胞鑒定:NSE免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
海馬神經(jīng)元
細胞詳述
海馬體主要負責(zé)記憶和學(xué)習(xí),日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。
神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長突起,由細胞體和細胞突起構(gòu)成。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細胞鑒定:NSE免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。