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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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人胚肺二倍體細胞;HEL-1
人胚肺二倍體細胞;HEL-1
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更新時間:2017-06-06 10:19:56瀏覽次數(shù):445

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【簡單介紹】
人胚肺二倍體細胞;HEL-1
收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時銷售人員,我們將盡快為您解決。

細胞名稱  人胚肺二倍體細胞;HEL-1  
形態(tài)特性   成纖維細胞樣   
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細胞系來自一男性胎兒的正常肺組織,1986年由昆明細胞庫建立。   
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS  
傳代方法   1:2傳代;3-4天一次  
傳代情況  P5  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測  熒光法(-)   
STR   -  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類 人胚肺二倍體細胞;HEL-1
實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。

注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
促進胸腺淋巴細胞的發(fā)源,在這個動態(tài)過程中同時分泌一些必要的子影響皮質(zhì)小室。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常胸腺組織。  
2)細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。  
胸腺基質(zhì)細胞  
細胞詳述  
胸腺作為哺乳動物的中樞免疫器官,不僅是T淋巴細胞分化、發(fā)育、成熟,同時向外周T細胞庫輸出T淋巴細胞的場所。胸腺的結(jié)構(gòu)表面有結(jié)締組織被摸,結(jié)締組織伸入胸腺實質(zhì)把胸腺分成許多不*分隔的小葉。其中,結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成,對胸腺中的其他細胞起到保護和支持作用。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常胸腺組織。  
2)細胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:長梭形狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。  
腎小管上皮細胞  
細胞詳述  
腎小管與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收和排泌作用.腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu),分布位置和功能分成三部分;近端小管、髓袢和遠端小管。  
腎小管平均長約30-50mm,均由單層上皮構(gòu)成,缺血、感染和毒物可引起腎小管上皮細胞變性壞死,導(dǎo)致腎功能障礙。醛固酮、抗利尿激素、心鈉素、甲狀旁腺激素等,也可導(dǎo)致腎小管功能改變。由于各段腎小管結(jié)構(gòu)和功能不同,故出現(xiàn)功能障礙時表現(xiàn)各異。  
細胞特性  
1)組織來源于實驗動物的正常腎臟組織。  
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。  
3)鑒定細胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細菌、酵母和真菌。  
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。  
腎系膜細胞  
細胞詳述  
腎系膜細胞是腎小球內(nèi)非?;钴S的細胞,具有分泌細胞基質(zhì)、產(chǎn)生細胞子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細胞收縮的功能。同時還可產(chǎn)生和降解多種細胞



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