目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>海藻糖系列>> 海藻糖酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
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更新時(shí)間：2023-12-26 09:28:30瀏覽次數(shù)：629評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6718 |
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注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：海藻糖酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6718
產(chǎn)品分類：海藻糖系列
商品介紹：
測(cè)定意義: THL（EC 3.2.1.28）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應(yīng)。 測(cè)定原理： 采用3.5－二硝基水楊酸法測(cè)定THL催化海藻糖產(chǎn)生的還原糖的含量。還原糖與3.5－二硝基水楊酸共熱生成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應(yīng)液的顏色深度成正比，由此判斷THL活性的高低。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1瓶 RWPE-1細(xì)胞株 RWPE-1 低溫運(yùn)輸和保存
改良胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（mTSB） 250g
25mL 快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠 DEAE-Sepharose Fast Flow 4℃保存
50T 傳染性膿皰病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50L Tricine-SDS-PAGE陽(yáng)極電泳液（干粉） Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存
2 ug pYES2NT/C pYES2NT/C 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
4次 大提柱式土壤DNAout Maxi Column Soil DNAOUT 常溫
250mL Sodium Citrate Buffer（檸檬酸鈉緩沖液），0.5M, pH5.0 Sodium Citrate Buffer，0.5M, pH5.0 常溫保存
檸檬酸鐵銨（0.05g/支） ironcitrate 1ml/支*5
1瓶 3T3-Swiss albino細(xì)胞株 3T3-Swiss albino 低溫運(yùn)輸和保存
1個(gè) 陶瓷研缽 （直徑60 mm） 常溫
海藻糖酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Phospho-FAK(Tyr407) 磷酸化粘著斑激抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD28 CD28抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-DAXX (Ser671) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
SMC2 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
ACADM/MCAD 酰基輔A脫中鏈抗體 0.2ml
CaMK2a 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體 規(guī)格: 0.1ml
IL-17A 白介素-17抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-E2F1 (Ser364) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
SLC9A9 鈉通道蛋白9家族A9抗體 規(guī)格: 0.2ml
AAT/Tryptase α-1抗胰蛋白抗體 0.1mlATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Talin 踝蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlNNF1R/PMF1 多胺調(diào)控因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDK5RAP2 CDK5激活結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlRibonuclease 6 核糖核酸6抗體 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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