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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>海藻糖系列>> 海藻糖酶測試盒微量法

海藻糖酶測試盒微量法
  • 海藻糖酶測試盒微量法
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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時間:2023-12-26 10:36:14瀏覽次數(shù):588評價

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貨號 BK-01S6717
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

海藻糖酶測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6717

商品介紹:

測定意義:

THLEC 3.2.1.28)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應(yīng)。

測定原理:

采用3.5-二硝基水楊酸法測定THL催化海藻糖產(chǎn)生的還原糖的含量。還原糖與3.5-二硝基水楊酸共熱生成棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應(yīng)液的顏色深度成正比,由此判斷THL活性的高低。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

LB瓊脂(lennox)  250g

100次 柱式質(zhì)粒 DNAout Column Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

2 ug pET-32 Xa/LIC pET-32 Xa/LIC 低溫運輸,-20℃保存

無菌檢查培養(yǎng)基  

1瓶 A204細(xì)胞株 A204 低溫運輸和保存

1個 15mLDNA超濾離心管(30-50KD)  

24 T 總抗氧化能力測試盒(比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

500mL MES SDS Running Buffer,20X MES SDS Running Buffer,20X 常溫保存

100次 真菌種屬鑒定 PCR Mix 2(UN) Fungal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

50T 人雌激素受體基因PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基  250g

海藻糖酶測試盒微量法phospho-P53(Thr55)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

GCOM1  GCOM1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RKIP (Ser 153)  磷酸化Raf激抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

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Rabbit Anti-Bov IgG/APC  APC標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

S100A4  S100A4抗體 規(guī)格: 0.1ml

PRPF4  PRPF4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ADCK1  ADCK1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG  羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 1mg

KAT13A/SRC1  類固醇受體激活蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

ZHX2/Alpha fetoprotein regulator 1  甲胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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