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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供昆蟲卵巢細(xì)胞；SF9的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細(xì)胞名稱     昆蟲卵巢細(xì)胞；SF9        
形態(tài)特性      圓形         
生長特性     貼壁/懸浮生長        
特征特性      該細(xì)胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織，可以用于復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體。         
培養(yǎng)條件      Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)  10%FBS         
傳代方法      1:5或更多傳代；2~3天換液1次。        
傳代情況     P36        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測     培養(yǎng)法（-）         
STR      -        
同工酶             
染色體               
使用權(quán)限     A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

ITGB1     cDNA    Human    人 Integrin beta1 轉(zhuǎn)錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
RAC1     cDNA    Human    人 RAC1 / MIG5 轉(zhuǎn)錄變體Rac1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
IL2RB     cDNA    Mouse    小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
MAP3K8     cDNA    Human    人 MAP3K8 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
GDF15     cDNA    Human    人 GDF-15 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
VASN     cDNA    Human    人 VASN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
DIXDC1     cDNA    Human    人 DIXDC1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TLR10     cDNA    Human    人 TLR10 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SMURF2     cDNA    Human    人 SMURF2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
TGFB1     cDNA    Human    人 TGF-beta 1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
PDCD1     cDNA    Mouse    小鼠 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CTSB     cDNA    Mouse    小鼠 CTSB 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
CD274     cDNA    Mouse    小鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
LRG1     cDNA    Human    人 LRG1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
PFKFB3     cDNA    Human    人 PFKFB3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
SIRPA     cDNA    Human    人 SIRPA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
MTOR     cDNA    Human    人 MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
NTRK1     cDNA    Human    人 TrkA / NTRK1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
TGFB1     cDNA    Human    人 TGF-beta 1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
CCL20     cDNA    Human    人 CCL20 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
HGF     cDNA    Human    人 HGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
TNFSF10     cDNA    Human    人 TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽